NIS-Kazakhstan #

Enhanced PET degradation #

PET hydrolase (PETase) and mono(2-hydroxyethyl) terephthalate hydrolase (MNETase) are known to synergistically convert PET into its monomeric building blocks. Our team developed six bacterial expression vectors with PETase and six dual expression plasmids containing PETase and MHETase enzymes for optimal PET degradation using Pseudomonas putida, targeting scalability in PET recycling plants. Due to time constraints, we focused on comparing the mutant form of BBa_J435500_W159H_S238F enzyme with wildtype PETase, using p-nitrophenyl butyrate (pNPB) as a PET analog. Under conditions of 2500 nanomolar pNPB, pH 9.0, and 30°C, the modified PETase’s activity exceeded the wildtype’s by seven-fold. This highlights the potential of BBa_J435500_W159H_S238F for developing PET recycling strategies. Data from iGEM 2019 in Toronto further confirms our results indicating the superior performance of our construct, highlighting the critical role of enzyme modification in combating the plastic pollution problem.

PETヒドロラーゼ（PETase）とmono（2-ヒドロキシエチル）テレフタル酸ヒドロラーゼ（MHETase）は、PETをそのモノマーの構成要素に相乗的に変換することで知られています。私たちのチームは、Pseudomonas putidaを使用し、PETリサイクル工場での拡張性をターゲットに、最適なPET分解のためのPETaseを含む6つのバクテリア発現ベクターと、PETaseとMHETase酵素を含む6つの二重発現プラスミドを開発しました。時間の制約により、我々は、p-ニトロフェニルブチレート（pNPB）をPETアナログとして使用し、野生型のPETaseとBBa_J435500_W159H_S238F酵素の変異体を比較しました。2500ナノモルのpNPB、pH 9.0、そして30°Cの条件下で、修正されたPETaseの活性は、野生型のそれを7倍超えました。これはBBa_J435500_W159H_S238Fの開発のためのPETリサイクル戦略の可能性を示しています。トロントのiGEM 2019からのデータは、私たちの構造体の優れた性能をさらに確認し、プラスチック汚染問題と戦うための酵素改変の重要な役割を強調しています。

reference:

• iGEM NIS-Kazakhstan Team Information
• iGEM NIS-Kazakhstan Wiki