WVHS-SanDiego #

Introducing PETase and MHETase into Alteromonas #

The abundance of polyethylene terephthalate (PET) plastics in the oceans cause issues for all types of life. The sequential enzymes, PETase and MHETase, found in the soil bacterium Ideonella sakaiensis, have shown degradation of PET plastics through metabolic activity. However, because I. sakaiensis is found mainly in soil, it is not an ideal host when attempting to degrade PET plastics in the ocean. By introducing these genes into Alteromonas macleodii, a marine bacterium, there is the possibility of being able to degrade PET in saltwater conditions using its ability to form biofilm. Using the Loop Assembly method, plasmids were constructed containing the genes that encode for PETase and MHETase. These plasmids were created in Escherichia coli and were subsequently conjugated into Alteromonas. Ongoing experiments have shown the proper L2 inserts found in our Alteromonas cells and we predict these cells should be able to degrade PET plastics in marine conditions.

海洋に存在するポリエチレンテレフタレート（PET）プラスチックの多量排出は、あらゆる生命種に問題を引き起こしています。土壌細菌Ideonella sakaiensisに見つかった逐次酵素であるPETaseとMHETaseは、PETプラスチックを代謝活動を通じて劣化させることを示しています。しかし、I. sakaiensisは主に土壌で見つかるため、海洋でPETプラスチックを分解する際には最適な宿主ではありません。この遺伝子を海洋バクテリアのAlteromonas macleodiiに導入することで、バイオフィルムを形成する能力を利用して塩水環境でPETを分解できる可能性があります。ループアセンブリ法を使用して、PETaseとMHETaseの遺伝子をエンコードするプラスミドを構築しました。これらのプラスミドは大腸菌で作成され、その後Alteromonasに共役しました。進行中の実験では、私たちのAlteromonas細胞の中に適切なL2挿入体が見つかっており、これらの細胞は海洋条件下でPETプラスチックを分解できると予測しています。

reference:

• iGEM WVHS-SanDiego Team Information
• iGEM WVHS-SanDiego Wiki