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The willow leaf beetle Plagiodera versicolora (Coleoptera: Chrysomelidae) is one of the most important forest pests worldwide, which primarily feeds the leaves of Salicacease plants. In this study, a combined strategy of microbial control and RNA interference-based technology was utilized to manage the P. versicolora. Recently, our team isolated a Pseudomonas chlororaphis B3-3G strain that exhibits certain resistance to P. versicolora, but the insecticidal effect was not ideal. To improve its anti-insect effect, we proposed to express double-stranded (dsRNAs) targeting the actin gene of P. versicolora in P. chloroaphis B3-3G. To further increase the accumulation of dsRNA, the ribozyme III encoding gene of P. chloroaphis B3-3G was knocked out via homologous recombination mediated by pK18mobsacB. At last, the dsRNA-producing Pseudomonas was sprayed on leaves of Salicacease plants to test its insecticidal activity.

柳の葉甲虫Plagiodera versicolora（コウチュウ目：ノミバエ科）は、世界中の森林害虫の中でも重要な位置付けがされ、主にヤナギ科の植物の葉を餌としています。 当研究では、微生物制御とRNA干渉による技術を組み合わせてP. versicoloraを管理する戦略が採用されました。最近、当チームは P. versicoloraに対してある程度の抵抗性を示すPseudomonas chlororaphis B3-3G株を単離しましたが、殺虫効果は理想的ではありませんでした。その抗虫効果を向上させるため、P. chloroaphis B3-3GでP. versicoloraのアクチン遺伝子を標的とする二本鎖（dsRNAs）を発現させることを提案しました。さらに、dsRNAの蓄積を増加させるために、P. chloroaphis B3-3GのリボザイムIIIエンコード遺伝子がpK18mobsacBによる同系統組み替えでノックアウトされました。最後に、DSRNAを生産するPseudomonasがヤナギ科の植物の葉に散布され、その殺虫活性が試されました。

reference:

• iGEM HUBU-WUHAN-CHINA Team Information
• iGEM HUBU-WUHAN-CHINA Wiki